植物细胞为什么要液氮研磨（液氮冷冻研磨对叶绿素的影响）

植物RNA提取,研磨时为什么在液氮下操作

液氮的温度可以达到零下190多度,研磨时在液氮下操作主要是由于：（1）植物细胞在极低温度时细胞壁会变得很脆,有利于细胞更好的破碎,释放RNA.（2）RNA容易降解,低温可以防止由于研磨产生的热降解RNA.

植物DNA提取的原理和方法是什么？

原理就是去掉植物细胞壁

细胞膜

质体

线粒体

叶绿体

剩下细胞核了。就是DNA了。

通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞，由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨，材料易于破碎，并减少研磨过程中各种酶类的作用。

十二烷基肌酸钠(sarkosyl)、十六烷基三甲基溴化铵(hexadyltrimethyl

ammomum

bromide，简称为CTAB)、十二烷基硫酸钠(sodium

dodecyl

sulfate，简称SDS)等离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来。再加入苯酚和氯仿等有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得植物总DNA溶液

植物DNA提取时为什么要在液氮中研磨

植物细胞有细胞壁，液氮可以让细胞冷冻起来，变得很脆，这样容易破细胞壁。

同时，液氮的超低温可以大大降低酶活性，防止降解。

为什么研磨新鲜叶片要加液氮

液氮变为气体时要吸收大量的热，使叶片瞬间冷冻。这样研磨起来就更彻底，更重要的是这种冷冻的方法不会破坏叶片细胞内所含的物质的形态。

植物总rna提取为什么要加入液氮研磨

1、使细胞变脆，便于破碎。

2、低温保护rna，使不被降解。

液氮研磨的原理

分子生物学是当前生命科学领域的前沿学科,其理论与技术已渗透到各学科领域,而分子生物学实验在生命科学研究中显得相当重要。在实际工作中,许多实验材料比如动物身上的肌肉组织、结缔组织、骨组织、毛发组织等,植物的根、茎、叶、种子等均需磨碎,随后才能对其成分、基因与蛋白质及结构和功能进行研究。

液氮研磨在分子生物学实验中应用广泛,特别是有关核糖核酸(RNA)、脱氧核糖核酸(DNA)的分离。液氮的温度为一196℃,它既能使各种组织成分不易被破坏或降解,又能使组织变硬,脆性增加易于磨碎。正是由于液氮的温度极低,操作时要特别小心。液氮研磨，一是为了终止细胞内外一切生物反应，比如提取RNA时，防止RNA酶的降解反应等；还有一个原因，就是在液氮中的细胞完全冻硬了，研磨可以达到很好的破胞效果，将细胞磨成粉，使里边的物质释放出来。

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